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細胞研究*的細胞體積分析
2010-7-6
1775
生物、藥物等許多的研究均需要通過觀察細胞體積的變化或細胞數目增減的來判斷和評估實驗的效果。由于細胞所處環境的改變可促使其自身體積做出相應的變化,以便適應改變后的環境大致新的平衡。由于并不能清晰地知道該種細胞體積變化規律,因此必須檢測其體積或細胞數目隨條件、時間的變化。細胞的發育與細胞分裂周期級數遞增均需要連續不斷的細胞增殖。在培養液中正在增殖的細胞在其分裂前其體積將增大至原體積的兩倍。然而對細胞發育與分裂的速度作如何調整才能保證細胞體積的不變并不明確。因此,測量細胞的體積的變...
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細胞凋亡實驗
2010-7-2
1595
二、實驗原理細胞死亡根據其性質、起源及生物學意義區分為凋亡和壞死兩種不同類型。凋亡普遍存在于生命界,在生物個體和生存中起著非常重要的作用。它是細胞在一定生理條件下一系列順序發生事件的組合,是細胞遵循一定規律自己結束生命的自主控制過程。細胞凋亡具有可鑒別的形態學和生物化學特征。在形態上可見凋亡細胞與周圍細胞脫離接觸,細胞變園,細胞膜向內皺縮、胞漿濃縮、內質網擴張、細胞核固縮破裂呈團塊狀或新月狀分布、內質網和細胞膜進一步融合將細胞分成多個完整包裹的凋亡小體,凋亡小體zui后被吞噬...
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T淋巴細胞的分離技術
2010-7-1
1779
(一)原理混合單個核細胞懸液在通過尼龍毛柱時,B細胞、漿細胞、單核細胞和一些輔助細胞被選擇性粘附于尼龍毛上,而多數T細胞則通過尼龍毛柱,這是獲得富含T細胞群的有效方法。(二)材料及試劑1.尼龍毛(FemwallLaboratories,LP-1LeukoqakleukocyteFilters)。2.燒杯、鋁箔、漏斗、一次性手套等。3.裝填尼龍毛柱,一次性注射器。4.取自然沉降的上層血漿,過聚蔗糖—泛影葡胺分層液后,獲取的血漿和分層液之間的單個核細胞層。(三)操作方法1.尼龍毛...
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細胞凋亡的幾種檢測方法
2010-6-30
1854
一、形態學觀察方法1、HE染色、光鏡觀察:凋亡細胞呈圓形,胞核深染,胞質濃縮,染色質成團塊狀,細胞表面有“出芽”現象。2、丫啶橙(AO)染色,熒光顯微鏡觀察:活細胞核呈黃綠色熒光,胞質呈紅色熒光。凋亡細胞核染色質呈黃綠色濃聚在核膜內側,可見細胞膜呈泡狀膨出及凋亡小體。3、臺盼藍染色:如果細胞膜不完整、破裂,臺盼藍染料進入細胞,細胞變藍,即為壞死。如果細胞膜完整,細胞不為臺盼藍染色,則為正常細胞或凋亡細胞。此方法對反映細胞膜的完整性,區別壞死細胞有一定的幫助。4、透射電鏡觀察:...
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生物傳感器的研究現狀及應用
2010-6-25
2581
一、引言從1962年,Clark和Lyonszui先提出生物傳感器的設想距今已有40年。生物傳感器在發酵工藝、環境監測、食品工程、臨床醫學、軍事及軍事醫學等方面得到了深度重視和廣泛應用。在zui初15年里,生物傳感器主要是以研制酶電極制作的生物傳感器為主,但是由于酶的價格昂貴并不夠穩定,因此以酶作為敏感材料的傳感器,其應用受到一定的限制。近些年來,微生物固定化技術的不斷發展,產生了微生物電極。微生物電極以微生物活體作為分子識別元件,與酶電極相比有其獨到之處。它可以克服價格昂貴...
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小鼠單個核細胞分離一步梯度法去除死細胞
2010-6-24
2236
基本原理活細胞(密度較小)和死細胞(密度較大)密度不同,從而有助于將活的淋巴細胞和紅細胞分離。附加材料高密度溶液:Ficoll-Paque(Ficoll和泛影酸鈉;PharmaciaLKB)或Lympholyte-M(Cedarlane)12ml或50ml聚丙烯離心管(比聚苯乙烯離心管好)注:Ficoll-Paque和Lympholyte-M的密度與溫度有關;該方法中所采用的以及其他商品化的高密度溶液適合在室溫中使用。因此應注意使細胞懸液、離心和高密度溶液控制在室溫。否則會因...